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Triton-NH4OH細胞裂解液實驗說明書

發布時間:2022-08-31 閱讀:52

  標簽:細胞裂解液 溶液 古朵生物 裂解緩沖液


  Triton-NH4OH細胞裂解液實驗說明書


  【信息說明】

  產品名稱:Triton-NH4OH細胞裂解液

  規格:100ml/500ml

  分類:細胞組分分離

  儲存條件:4℃,12個月

  用途:裂解緩沖液

  主要成分:無菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS組成。

  Triton-NH4OH細胞裂解液【使用方法】

  A、組織細胞樣本的常規操作

  1、制備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過適當方法制備成細胞懸液,離心棄上清。

  2、裂解:加入3~5倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解。本操作步驟在4℃條件下操作佳,亦可在室溫下操作。

  3、離心: 4℃,離心5min,棄紅色上清。如無低溫離心機,本步驟亦可在室溫下操作。

  4、如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述步驟2和步驟3各一次。

  5、洗滌:根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,離心2~3min,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

  6、如有必要,重復上述步驟5一次,共洗滌1~2次。

  7、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養等后續實驗。

  B、血液樣本的常規操作

  1、取新鮮抗凝血,離心5min,棄上清。

  2、 裂解:加入6~10倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解。本操作步驟在4℃條件下操作佳,亦可在室溫下操作。

  3、離心:4℃,400~500g離心5min,棄紅色上清。如無低溫離心機,本步驟亦可在室溫下操作。

  4、如果發現紅細胞裂解不完全,可以重復上述步驟2和步驟3一次。

  5、洗滌: 根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,離心2~3min,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

  6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養等后續實驗。

  注意: 對于微量或少量的血液樣本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer進行第2步操作,并在4℃或室溫裂解4~15min。

  Triton-NH4OH細胞裂解液【簡介說明】

  在生物科研領域,經常需要去除紅細胞,去除紅細胞的方法有多種,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH細胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)經過優化配方,在裂解無核紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(Lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。

  本裂解液經過濾除菌,經過Triton-NH4OH Lysis Buffer處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續的細胞培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。

  【自備材料】

  1、胰蛋白酶

  2、離心機

  3、PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液

  4、胎牛血清

  Triton-NH4OH細胞裂解液實驗說明書 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。

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